血培养报阳,转种却无菌生长?
2018-08-07   检验医学网

作者:湖北省中西医结合医院(新华医院)检验科  陈贝


正常人的血液中是无菌的,血液感染是一种危重的全身感染,对其进行病原菌的检验,提供病原学的诊断极为重要;血培养是诊断血流感染最有效的方法之一,快速正确的检出血流感染的病原菌可以提高患者的治愈率和降低死亡率。


随着现在医学的发展,广谱、超广谱抗菌药物的广泛使用,耐药菌、条件致病菌和非致病菌在血液感染中的发病率显著增多,在各种感染中居首位,其死亡率高达20%~50%。


当少量细菌侵入血液循环,为一过性,不繁殖或者很少繁殖,不引起或引起轻微的炎症反应者称为菌血症,若有全身性炎症反应的表现称为脓毒血症。血液标本的细菌培养是诊断菌血症基本而重要的方法。


而对于血培养的假阳性一直是困扰临床的问题,而且判断假阳性比较困难,很难确认是否是假阳性还是其他种种原因造成的转种失败,因而目前将血培养常见的假阳性和转种失败的原因进行总结分析,以供判断。


环境原因

1、剧烈的温度变化

实验室环境温度剧烈变化造成血培养的生长曲线波动而导致的假阳性,建议维持实验室的温度相对恒定,室温保持在15~25℃之间。仪器避免阳光直射或空调吹风口。


2、供电电压

仪器连接的电压不稳定或同一电源下连接其他大功率的设备,并且有频繁使用,引发电压波动。会导致生长曲线因电压而波动。建议如果电压不稳可以考虑配置稳压电源,不要将血培养仪和大功率的电器设备例如灭菌锅,离心机等位于同一线路上。


仪器和培养瓶的原因

1、仪器

仪器是否按时保养和校准。此外在校准空位的过程中,需要保证仪器中没有正在培养的血培养瓶,不然可能会报告假阳性。


2、血培养瓶

确认血培养瓶的送检流程符合要求,在送检过程中无剧烈的问题变化。如果血培养瓶不能及时上机,建议在室温进行保存。在35℃保存时间超过12小时或放2-8℃冰箱保存可能会造成漏检或假阳性。


在血培养瓶上机前检查,标签是否完整,是否过期,培养基底部是否变色。培养瓶需要常温避光保存,避免阳光直射。


样本因素或其他原因

1、采血量

采血量过多或过少,血液细胞本身也能代谢产生CO2,无菌血液在血培养瓶培养时也会产生本地曲线的变化,当采血量过多的时候可能会造成假阳性,因而建议控制采血量。此外对于部分肿瘤病人,由于其血液细胞的代谢率较高,也可能引发假阳性,对于这部分病人目前尚无完美的解决方法。


2、对于阳性标本的转种失败误判假阳性

血培养标本阳性后需要进行染色图片和转种。推荐使用含血的BHI琼脂进行培养,使用一般哥伦比亚血平板,对于一些营养条件要求较高的细菌可能会传代失败。如果发现血培养涂片有菌,而转种失败的情况,建议更换营养条件更高的培养基进行传代。此外部分菌株存在自溶现象,如果报阳后不能及时转种也有可能转种失败。


判断假阳性的方法

如果血培养仪报阳,而转种无细菌,如何分析是假阳性或者是转种失败?推荐按照如下的流程进行分析:


1、血培养直接涂片

对于所有血培养报阳的血培养瓶必须进行直接染色图片镜检,有条件可以联系临床发送1级报告。如果直接镜检阳性,而转种无细菌生长,转种失败的可能性极大,建议SN或FN的阳性瓶使用厌氧平板转种并在使用厌氧环境进行培养,对于PF,SA,FA的阳性瓶,使用含血的BHI琼脂进行转种。


2、再次培养

如果血培养直接涂片找不到细菌,且转种平板也为阴性,建议可以将报阳血培养瓶抽出10ml打入新的血培养瓶重新进行培养,如果仍报阳,基本可以判断是传代过程的问题,如果5天后报阴,基本是假阳性。


3、对于生长曲线的判断

对于阳性瓶建议对生长曲线进行观察,确认曲线是否连续,是否有断点或较大波动,如果存在可能有设备方面的问题,可以联系厂家或代理商工程师进行设备的检查和校准。


血培养目前是临床上诊断败血症的金标准,也是获得血流感染病原菌,并进行下一步鉴定药敏试验的主要途径,因而保证血培养系统时刻处于最佳状态,其年检必不可少,此外做好年检和校准工作也能降低血培养的假阳性,并且减少漏检,提高血培养的准确性,提高用户报告的质量,减少不必要工作。


本文封面图片由陕西省宝鸡市人民医院检验科白雅红提供,致谢!


编辑:Rose  审校:Nicole


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